Дзякуй за наведванне сайта nature.com. Версія браўзера, якой вы карыстаецеся, мае абмежаваную падтрымку CSS. Для найлепшага карыстання рэкамендуем выкарыстоўваць апошнюю версію браўзера (або адключыць рэжым сумяшчальнасці ў Internet Explorer). Акрамя таго, каб забяспечыць бесперапынную падтрымку, гэты сайт не будзе ўтрымліваць стылі або JavaScript.
Меламін з'яўляецца прызнаным харчовым забруджвальнікам, які можа прысутнічаць у некаторых катэгорыях прадуктаў харчавання як выпадкова, так і наўмысна. Мэтай гэтага даследавання было праверыць выяўленне і колькаснае вызначэнне меламіну ў дзіцячых сумесях і сухім малацэ. Усяго было прааналізавана 40 камерцыйна даступных узораў прадуктаў харчавання, у тым ліку дзіцячых сумесяў і сухога малака, з розных рэгіёнаў Ірана. Прыблізнае ўтрыманне меламіну ва ўзорах вызначалася з дапамогай сістэмы высокаэфектыўнай вадкаснай храматаграфіі з ультрафіялетавым выпраменьваннем (ВЭЖХ-УФ). Для выяўлення меламіну ў дыяпазоне 0,1–1,2 мкг/мл была пабудавана калібровачная крывая (R2 = 0,9925). Межы колькаснага вызначэння і выяўлення складалі 1 мкг/мл і 3 мкг/мл адпаведна. Меламін быў пратэставаны ў дзіцячых сумесях і сухім малацэ, і вынікі паказалі, што ўзровень меламіну ва ўзорах дзіцячых сумесяў і сухога малака складаў 0,001–0,095 мг/кг і 0,001–0,004 мг/кг адпаведна. Гэтыя значэнні адпавядаюць заканадаўству ЕС і Кодэксу Аліментарыус. Важна адзначыць, што ўжыванне гэтых малочных прадуктаў са зніжаным утрыманнем меламіну не ўяўляе значнай рызыкі для здароўя спажыўцоў. Гэта таксама пацвярджаюць вынікі ацэнкі рызыкі.
Меламін — гэта арганічнае злучэнне з малекулярнай формулай C3H6N6, атрыманае з цыянаміду. Яно мае вельмі нізкую растваральнасць у вадзе і прыблізна на 66% складаецца з азоту. Меламін — шырока выкарыстоўванае прамысловае злучэнне з шырокім спектрам законных ужыванняў у вытворчасці пластмас, угнаенняў і абсталявання для перапрацоўкі харчовых прадуктаў (у тым ліку харчовай упакоўкі і кухоннага посуду)1,2. Меламін таксама выкарыстоўваецца ў якасці носьбіта лекаў для лячэння захворванняў. Высокая доля азоту ў меламіне можа прывесці да няправільнага выкарыстання гэтага злучэння і надання ўласцівасцей бялковых малекул харчовым інгрэдыентам3,4. Такім чынам, даданне меламіну ў харчовыя прадукты, у тым ліку малочныя прадукты, павялічвае ўтрыманне азоту. Такім чынам, была памылкова зроблена выснова, што ўтрыманне бялку ў малацэ вышэйшае, чым было на самой справе.
На кожны дададзены грам меламіну ўтрыманне бялку ў ежы павялічваецца на 0,4%. Аднак меламін добра раствараецца ў вадзе і можа прычыніць больш сур'ёзную шкоду. Даданне 1,3 грама меламіну ў вадкія прадукты, такія як малако, можа павялічыць утрыманне бялку ў малацэ на 30%5,6. Нягледзячы на ​​тое, што меламін дадаецца ў ежу жывёльнага і нават чалавечага паходжання для павелічэння ўтрымання бялку7, Камісія па Кодэкс Аліментарыус (CAC) і нацыянальныя органы ўлады не ўхвалілі меламін у якасці харчовай дабаўкі і аднеслі яго да небяспечных рэчываў пры праглынанні, удыханні або ўсмоктванні праз скуру. У 2012 годзе Міжнароднае агенцтва па даследаванні раку Сусветнай арганізацыі аховы здароўя (СААЗ) аднесла меламін да канцерогенаў класа 2B, паколькі ён можа быць шкодным для здароўя чалавека8. Доўгатэрміновае ўздзеянне меламіну можа выклікаць рак або пашкоджанне нырак2. Меламін у ежы можа ўступаць у комплекс з цыянуравай кіслатой, утвараючы нерастваральныя ў вадзе жоўтыя крышталі, якія могуць пашкодзіць тканіны нырак і мачавой бурбалкі, а таксама рак мочэвыводзячых шляхоў і страціць вагу9,10. Гэта можа выклікаць вострае харчовае атручванне, а ў высокіх канцэнтрацыях — смерць, асабліва ў немаўлят і маленькіх дзяцей.11 Сусветная арганізацыя аховы здароўя (СААЗ) таксама ўстанавіла дапушчальную сутачную норму спажывання (ДДС) меламіну для людзей на ўзроўні 0,2 мг/кг масы цела ў дзень, зыходзячы з рэкамендацый CAC.12 Упраўленне па кантролі за харчовымі прадуктамі і лекамі ЗША (FDA) устанавіла максімальны ўзровень рэшткаў меламіну на ўзроўні 1 мг/кг у дзіцячых сумесях і 2,5 мг/кг у іншых прадуктах.2,7 У верасні 2008 года паведамлялася, што некалькі айчынных вытворцаў дзіцячых сумесяў дадалі меламін у сухое малако, каб павялічыць утрыманне бялку ў сваіх прадуктах, што прывяло да атручвання сухім малаком і справакавала агульнанацыянальны інцыдэнт з атручваннем меламінам, у выніку якога захварэлі больш за 294 000 дзяцей і больш за 50 000 былі шпіталізаваны.13
Грудное гадаванне не заўсёды магчыма з-за розных фактараў, такіх як цяжкасці гарадскога жыцця, хваробы маці або дзіцяці, што прыводзіць да выкарыстання дзіцячых сумесяў для харчавання немаўлят. У выніку былі створаны фабрыкі па вытворчасці дзіцячых сумесяў, максімальна набліжаных па складзе да груднога малака14. Дзіцячыя сумесі, якія прадаюцца на рынку, звычайна вырабляюцца з каровінага малака і звычайна вырабляюцца са спецыяльнай сумессю тлушчаў, бялкоў, вугляводаў, вітамінаў, мінералаў і іншых злучэнняў. Каб быць блізкімі да груднога малака, утрыманне бялку і тлушчу ў сумесі вар'іруецца, і ў залежнасці ад тыпу малака яны ўзбагачаюцца такімі злучэннямі, як вітаміны і мінералы, напрыклад, жалеза15. Паколькі немаўляты з'яўляюцца адчувальнай групай і існуе рызыка атручвання, бяспека спажывання сухога малака мае жыццёва важнае значэнне для здароўя. Пасля выпадку атручвання меламінам сярод кітайскіх немаўлят краіны па ўсім свеце звярнулі пільную ўвагу на гэтае пытанне, і адчувальнасць гэтай галіны таксама павялічылася. Таму асабліва важна ўзмацніць кантроль над вытворчасцю дзіцячых сумесяў, каб абараніць здароўе немаўлят. Існуюць розныя метады выяўлення меламіну ў прадуктах харчавання, у тым ліку высокаэфектыўная вадкасная храматаграфія (ВЭЖХ), электрафарэз, сэнсарны метад, спектрафатаметрыя і імунаферментны аналіз антыген-антыцелы16. У 2007 годзе Упраўленне па кантролі за харчовымі прадуктамі і лекамі ЗША (FDA) распрацавала і апублікавала метад ВЭЖХ для вызначэння меламіну і цыянуравай кіслаты ў прадуктах харчавання, які з'яўляецца найбольш эфектыўным метадам вызначэння ўтрымання меламіну17.
Канцэнтрацыя меламіну ў дзіцячых сумесях, вымераная з дапамогай новага метаду інфрачырвонай спектраскапіі, вагалася ад 0,33 да 0,96 міліграма на кілаграм (мг/кг).18 Даследаванне, праведзенае ў Шры-Ланцы, паказала, што ўзровень меламіну ў сухім цэльным малацэ вагаўся ад 0,39 да 0,84 мг/кг. Акрамя таго, імпартныя ўзоры дзіцячых сумесяў утрымлівалі найвышэйшы ўзровень меламіну — 0,96 і 0,94 мг/кг адпаведна. Гэтыя ўзроўні ніжэйшыя за дапушчальную норму (1 мг/кг), але для бяспекі спажыўцоў неабходная праграма маніторынгу.19
У некалькіх даследаваннях вывучаўся ўзровень меламіну ў іранскіх дзіцячых сумесях. Каля 65% узораў утрымлівалі меламін, у сярэднім 0,73 мг/кг і максімум 3,63 мг/кг. У іншым даследаванні паведамлялася, што ўзровень меламіну ў дзіцячых сумесях вагаўся ад 0,35 да 3,40 мкг/кг, у сярэднім 1,38 мкг/кг. У цэлым, прысутнасць і ўзровень меламіну ў іранскіх дзіцячых сумесях ацэньваліся ў розных даследаваннях, прычым некаторыя ўзоры, якія змяшчалі меламін, перавышалі максімальную мяжу, устаноўленую рэгулюючымі органамі (2,5 мг/кг/карм).
Улічваючы велізарны аб'ём прамога і ўскоснага спажывання сухога малака ў харчовай прамысловасці і асаблівую важнасць дзіцячых сумесяў у харчаванні дзяцей, мэтай гэтага даследавання было праверыць метад выяўлення меламіну ў сухім малацэ і дзіцячых сумесях. Фактычна, першай мэтай гэтага даследавання была распрацоўка хуткага, простага і дакладнага колькаснага метаду выяўлення фальсіфікацыі меламіну ў дзіцячых сумесях і сухім малацэ з выкарыстаннем высокаэфектыўнай вадкаснай храматаграфіі (ВЭЖХ) і ультрафіялетавага (УФ) выяўлення; па-другое, мэтай гэтага даследавання было вызначэнне ўтрымання меламіну ў дзіцячых сумесях і сухім малацэ, якія прадаюцца на іранскім рынку.
Прыборы, якія выкарыстоўваюцца для аналізу меламіну, адрозніваюцца ў залежнасці ад месца вытворчасці прадуктаў харчавання. Для вымярэння рэшткаў меламіну ў малацэ і дзіцячай сумесі выкарыстоўваўся адчувальны і надзейны метад аналізу ВЭЖХ-УФ. Малочныя прадукты ўтрымліваюць розныя бялкі і тлушчы, якія могуць перашкаджаць вымярэнню меламіну. ​​Таму, як адзначаюць Сан і інш.22, перад інструментальным аналізам неабходная адпаведная і эфектыўная стратэгія ачысткі. У гэтым даследаванні мы выкарыстоўвалі аднаразовыя шпрыцавыя фільтры. У гэтым даследаванні мы выкарыстоўвалі калонку C18 для падзелу меламіну ў дзіцячай сумесі і сухім малацэ. На малюнку 1 паказана храматаграма для выяўлення меламіну. ​​Акрамя таго, аднаўленне ўзораў, якія змяшчалі 0,1–1,2 мг/кг меламіну, вагалася ад 95% да 109%, ураўненне рэгрэсіі складала y = 1,2487x − 0,005 (r = 0,9925), а значэнні адноснага стандартнага адхілення (RSD) вагаліся ад 0,8 да 2%. Даступныя дадзеныя паказваюць, што метад надзейны ў даследаваным дыяпазоне канцэнтрацый (табліца 1). Інструментальная мяжа выяўлення (LOD) і мяжа колькаснага вызначэння (LOQ) меламіну склалі 1 мкг/мл і 3 мкг/мл адпаведна. Акрамя таго, УФ-спектр меламіну прадэманстраваў паласу паглынання пры 242 нм. Метад выяўлення з'яўляецца адчувальным, надзейным і дакладным. Гэты метад можа быць выкарыстаны для руціннага вызначэння ўзроўню меламіну.
Падобныя вынікі былі апублікаваныя некалькімі аўтарамі. Для аналізу меламіну ў малочных прадуктах быў распрацаваны метад высокаэфектыўнай вадкаснай храматаграфіі з фотадыёдным масівам (ВЭЖХ). Ніжнія межы колькаснага вызначэння складалі 340 мкг/кг для сухога малака і 280 мкг/кг для дзіцячай сумесі пры 240 нм. Філацы і інш. (2012) паведамілі, што меламін не быў выяўлены ў дзіцячай сумесі з дапамогай ВЭЖХ. Аднак 8% узораў сухога малака ўтрымлівалі меламін на ўзроўні 0,505–0,86 мг/кг. Тытлміт і інш.23 правялі падобнае даследаванне і вызначылі ўтрыманне меламіну ў дзіцячай сумесі (нумар узору: 72) з дапамогай высокаэфектыўнай вадкаснай храматаграфіі з мас-спектрометрыяй/МС (ВЭЖХ-МС/МС) прыблізна 0,0431–0,346 мг/кг. У даследаванні, праведзеным Венкатасамі і інш. (2010) для ацэнкі меламіну ў дзіцячых сумесях і малацэ выкарыстоўваліся метады «зялёнай» хіміі (без ацэтанітрылу) і высокаэфектыўная вадкасная храматаграфія з адваротнай фазай (RP-HPLC). Дыяпазон канцэнтрацый узораў складаў ад 1,0 да 80 г/мл, а рэакцыя была лінейнай (r > 0,999). Метад паказаў аднаўленне 97,2–101,2 у дыяпазоне канцэнтрацый 5–40 г/мл, а ўзнаўляльнасць была меншай за 1,0% адноснага стандартнага адхілення. Акрамя таго, назіраныя значэнні LOD і LOQ склалі 0,1 г/мл і 0,2 г/мл адпаведна. Lutter і інш. (2011) вызначылі забруджванне меламінам каровінага малака і дзіцячых сумесяў на аснове малака з дапамогай HPLC-UV. Канцэнтрацыі меламіну вагаліся ад < 0,2 да 2,52 мг/кг. Лінейны дынамічны дыяпазон метаду ВЭЖХ-УФ складаў ад 0,05 да 2,5 мг/кг для каровінага малака, ад 0,13 да 6,25 мг/кг для дзіцячай сумесі з масавай доляй бялку <15% і ад 0,25 да 12,5 мг/кг для дзіцячай сумесі з масавай доляй бялку 15%. Вынікі LOD (і LOQ) склалі 0,03 мг/кг (0,09 мг/кг) для каровінага малака, 0,06 мг/кг (0,18 мг/кг) для дзіцячай сумесі <15% бялку і 0,12 мг/кг (0,36 мг/кг) для дзіцячай сумесі з 15% бялку, з суадносінамі сігнал/шум 3 і 1025 для LOD і LOQ адпаведна. Diebes і інш. (2012) даследавалі ўзровень меламіну ва ўзорах дзіцячай сумесі і сухога малака з выкарыстаннем ВЭЖХ/ДМД. У дзіцячых сумесях найменшы і найвышэйшы ўзроўні склалі 9,49 мг/кг і 258 мг/кг адпаведна. Мяжа выяўлення (LOD) складала 0,05 мг/кг.
Джавайд і інш. паведамілі, што рэшткі меламіну ў дзіцячых сумесях знаходзіліся ў дыяпазоне 0,002–2 мг/кг паводле дадзеных інфрачырвонай спектраскапіі з пераўтварэннем Фур'е (FT-MIR) (LOD = 1 мг/кг; LOQ = 3,5 мг/кг). Рэзай і інш.27 прапанавалі метад ВЭЖХ-ДДА (λ = 220 нм) для ацэнкі меламіну і дасягнулі LOQ 0,08 мкг/мл для сухога малака, што было ніжэй за ўзровень, атрыманы ў гэтым даследаванні. Сан і інш. распрацавалі RP-HPLC-DAD для выяўлення меламіну ў вадкім малацэ метадам цвёрдафазнай экстракцыі (SPE). Яны атрымалі LOD і LOQ 18 і 60 мкг/кг адпаведна, што з'яўляецца больш адчувальным, чым у бягучым даследаванні. Мантэсана і інш. пацвердзілі эфектыўнасць метаду ВЭЖХ-ДМД для ацэнкі ўтрымання меламіну ў бялковых дабаўках з мяжой колькаснага вызначэння 0,05–3 мг/кг, які быў менш адчувальным, чым метад, выкарыстаны ў гэтым даследаванні29.
Несумненна, аналітычныя лабараторыі адыгрываюць важную ролю ў ахове навакольнага асяроддзя шляхам маніторынгу забруджвальных рэчываў у розных узорах. Аднак выкарыстанне вялікай колькасці рэагентаў і растваральнікаў падчас аналізу можа прывесці да ўтварэння небяспечных рэшткаў. Таму ў 2000 годзе была распрацавана зялёная аналітычная хімія (ЗАХ) для памяншэння або ліквідацыі неспрыяльнага ўздзеяння аналітычных працэдур на аператараў і навакольнае асяроддзе26. Для ідэнтыфікацыі меламіну выкарыстоўваліся традыцыйныя метады выяўлення меламіну, у тым ліку храматаграфія, электрафарэз, капілярны электрафарэз і імунаферментны аналіз (ІФА). Аднак сярод шматлікіх метадаў выяўлення электрахімічныя датчыкі прыцягнулі вялікую ўвагу дзякуючы сваёй выдатнай адчувальнасці, селектыўнасці, хуткаму аналізу і зручным характарыстыкам30,31. Зялёныя нанатэхналогіі выкарыстоўваюць біялагічныя шляхі для сінтэзу нанаматэрыялаў, што можа скараціць утварэнне небяспечных адходаў і спажыванне энергіі, тым самым спрыяючы ўкараненню ўстойлівых практык. Нанакампазіты, напрыклад, вырабленыя з экалагічна чыстых матэрыялаў, могуць выкарыстоўвацца ў біясенсарах для выяўлення такіх рэчываў, як меламін32,33,34.
Даследаванне паказвае, што цвёрдафазная мікраэкстракцыя (ТФМЭ) эфектыўна выкарыстоўваецца дзякуючы больш высокай энергаэфектыўнасці і ўстойлівасці ў параўнанні з традыцыйнымі метадамі экстракцыі. Экалагічнасць і энергаэфектыўнасць ТФМЭ робяць яе выдатнай альтэрнатывай традыцыйным метадам экстракцыі ў аналітычнай хіміі і забяспечваюць больш устойлівы і эфектыўны метад падрыхтоўкі ўзораў35.
У 2013 годзе Ву і інш. распрацавалі высокаадчувальны і селектыўны біясенсар паверхневага плазмоннага рэзанансу (міні-SPR), які выкарыстоўвае сувязь паміж меламінам і антыцеламі да меламіну для хуткага выяўлення меламіну ў дзіцячай сумесі з дапамогай імунаферментнага аналізу. Біясенсар SPR у спалучэнні з імунаферментным аналізам (з выкарыстаннем кан'югаванага з меламінам бычынага сыроватачнага альбуміна) — гэта простая ў выкарыстанні і недарагая тэхналогія з мяжой выяўлення ўсяго 0,02 мкг/мл-136.
Насіры і Абасян выкарысталі высокапатэнцыйны партатыўны датчык у спалучэнні з кампазітамі аксіду графену і хітазану (GOCS) для выяўлення меламіну ў камерцыйных узорах37. Гэты метад паказаў звышвысокую селектыўнасць, дакладнасць і хуткасць адгуку. Датчык GOCS прадэманстраваў выдатную адчувальнасць (239,1 мкМ−1), лінейны дыяпазон ад 0,01 да 200 мкМ, канстанту афіннасці 1,73 × 104 і LOD да 10 нМ. Больш за тое, у даследаванні, праведзеным Чандрасехарам і інш. у 2024 годзе, быў выкарыстаны экалагічна чысты і эканамічна эфектыўны падыход. Яны выкарысталі экстракт лупіны папаі ў якасці аднаўляльніка для сінтэзу наначасціц аксіду цынку (ZnO-NPs) экалагічна чыстым метадам. Пасля гэтага была распрацавана ўнікальная тэхніка мікра-раманаўскай спектраскапіі для вызначэння меламіну ў дзіцячых сумесях. ZnO-NPs, атрыманыя з сельскагаспадарчых адходаў, прадэманстравалі патэнцыял як каштоўны дыягнастычны інструмент і надзейная, недарагая тэхналогія для маніторынгу і выяўлення меламіну38.
Алізадэ і інш. (2024) выкарысталі высокаадчувальную флуарэсцэнтную платформу на металарганічнай структуры (MOF) для вызначэння меламіну ў сухім малацэ. Лінейны дыяпазон і ніжняя мяжа выяўлення датчыка, вызначаныя з дапамогай 3σ/S, складалі ад 40 да 396,45 нМ (эквівалентна ад 25 мкг/кг да 0,25 мг/кг) і 40 нМ (эквівалентна 25 мкг/кг) адпаведна. Гэты дыяпазон значна ніжэй за максімальна дапушчальныя ўзроўні рэшткаў (MRL), устаноўленыя для ідэнтыфікацыі меламіну ў дзіцячых сумесях (1 мг/кг) і іншых узорах харчовых прадуктаў/кармоў (2,5 мг/кг). Флуарэсцэнтны датчык (тэрбій (Tb)@NH2-MIL-253(Al)MOF) прадэманстраваў больш высокую дакладнасць і больш дакладныя вымяральныя магчымасці, чым ВЭЖХ39, пры выяўленні меламіну ў сухім малацэ. Біясенсары і нанакампазіты ў зялёнай хіміі не толькі паляпшаюць магчымасці выяўлення, але і мінімізуюць небяспеку для навакольнага асяроддзя ў адпаведнасці з прынцыпамі ўстойлівага развіцця.
Прынцыпы зялёнай хіміі былі ўжытыя да розных метадаў вызначэння меламіну. ​​Адзін з падыходаў - распрацоўка метаду зялёнай дысперсійнай цвёрдафазнай мікраэкстракцыі з выкарыстаннем натуральнага палярнага палімера β-цыкладэкстрыну, зшытага цытрынавай кіслатой, для эфектыўнай экстракцыі меламіну 40 з такіх узораў, як дзіцячая сумесь і гарачая вада. Іншы метад выкарыстоўвае рэакцыю Маніха для вызначэння меламіну ў пробах малака. Гэты метад з'яўляецца недарагім, экалагічна чыстым і вельмі дакладным з лінейным дыяпазонам 0,1–2,5 праміле і нізкай мяжой выяўлення 41. Акрамя таго, быў распрацаваны эканамічна эфектыўны і экалагічна чысты метад колькаснага вызначэння меламіну ў вадкім малацэ і дзіцячай сумесі з выкарыстаннем інфрачырвонай прасвечвальнай спектраскапіі з пераўтварэннем Фур'е з высокай дакладнасцю і межамі выяўлення 1 праміле і 3,5 праміле адпаведна 42. Гэтыя метады дэманструюць прымяненне прынцыпаў зялёнай хіміі да распрацоўкі эфектыўных і ўстойлівых метадаў вызначэння меламіну.
У некалькіх даследаваннях былі прапанаваны інавацыйныя метады выяўлення меламіну, такія як выкарыстанне цвёрдафазнай экстракцыі і высокаэфектыўнай вадкаснай храматаграфіі (ВЭЖХ)43, а таксама хуткая высокаэфектыўная вадкасная храматаграфія (ВЭЖХ), якая не патрабуе складанай папярэдняй апрацоўкі або іённа-парных рэагентаў, тым самым памяншаючы колькасць хімічных адходаў44. Гэтыя метады не толькі забяспечваюць дакладныя вынікі вызначэння меламіну ў малочных прадуктах, але і адпавядаюць прынцыпам зялёнай хіміі, мінімізуючы выкарыстанне небяспечных хімічных рэчываў і памяншаючы агульны ўплыў аналітычнага працэсу на навакольнае асяроддзе.
Сорак узораў розных марак былі пратэставаны ў трох экзэмплярах, і вынікі прадстаўлены ў Табліцы 2. Узровень меламіну ў ўзорах дзіцячай сумесі і сухога малака вагаўся ад 0,001 да 0,004 мг/кг і ад 0,001 да 0,095 мг/кг адпаведна. Істотных змен паміж трыма ўзроставымі групамі дзіцячых сумесяў не назіралася. Акрамя таго, меламін быў выяўлены ў 80% сухога малака, але 65% дзіцячых сумесяў былі забруджаныя меламінам.
Утрыманне меламіну ў прамысловым сухім малацэ было вышэйшым, чым у дзіцячай сумесі, і розніца была значнай (p<0,05) (малюнак 2).
Атрыманыя вынікі былі ніжэйшымі за ліміты, устаноўленыя FDA (ніжэй за 1 і 2,5 мг/кг). Акрамя таго, вынікі адпавядаюць лімітам, устаноўленым CAC (2010) і EU45,46, г.зн. максімальна дазволеная мяжа складае 1 мг/кг для дзіцячай сумесі і 2,5 мг/кг для малочных прадуктаў.
Згодна з даследаваннем, праведзеным у 2023 годзе Ганаці і інш.47, утрыманне меламіну ў розных тыпах упакаванага малака ў Іране вагалася ад 50,7 да 790 мкг/кг. Іх вынікі былі ніжэйшыя за дапушчальную мяжу FDA. Нашы вынікі ніжэйшыя за вынікі Шодэра і інш.48 і Рымы і інш.49. Шодэр і інш. (2010) выявілі, што ўзровень меламіну ў сухім малацэ (n=49), вызначаны метадам ІФА, вагаўся ад 0,5 да 5,5 мг/кг. Рыма і інш. прааналізавалі рэшткі меламіну ў сухім малацэ метадам флуарэсцэнтнай спектрафатаметрыі і выявілі, што ўтрыманне меламіну ў сухім малацэ складала 0,72–5,76 мг/кг. У 2011 годзе ў Канадзе было праведзена даследаванне для маніторынгу ўзроўню меламіну ў дзіцячых сумесях (n=94) з выкарыстаннем вадкаснай храматаграфіі (LC/MS). Канцэнтрацыі меламіну былі ніжэйшыя за дапушчальную мяжу (папярэдні стандарт: 0,5 мг/кг). Малаверагодна, што выяўленыя падробленыя ўзроўні меламіну былі тактыкай, якая выкарыстоўвалася для павышэння ўтрымання бялку. Аднак гэта нельга растлумачыць выкарыстаннем угнаенняў, перамяшчэннем змесціва кантэйнераў або падобнымі фактарамі. Акрамя таго, крыніца меламіну ў сухім малацэ, імпартаваным у Канаду, не была раскрыта50.
Хасані і інш. вымералі ўтрыманне меламіну ў сухім і вадкім малацэ на іранскім рынку ў 2013 годзе і атрымалі падобныя вынікі. Вынікі паказалі, што, за выключэннем адной маркі сухога і вадкага малака, усе астатнія ўзоры былі забруджаныя меламінам, прычым узровень вагаўся ад 1,50 да 30,32 мкг г⁻¹ у сухім малацэ і ад 0,11 да 1,48 мкг мл⁻¹ у малацэ. Прыкметна, што цыянуравая кіслата не была выяўлена ні ў адным з узораў, што змяншае верагоднасць атручвання меламінам для спажыўцоў.51 Папярэднія даследаванні ацэньвалі канцэнтрацыю меламіну ў шакаладных вырабах, якія змяшчаюць сухое малако. Каля 94% імпартных узораў і 77% іранскіх узораў утрымлівалі меламін. Узровень меламіну ў імпартных узорах вагаўся ад 0,032 да 2,692 мг/кг, у той час як у іранскіх узорах — ад 0,013 да 2,600 мг/кг. У цэлым, меламін быў выяўлены ў 85% узораў, але толькі ў адной канкрэтнай маркі ўзровень перавышаў дапушчальную норму.44 Цітлм'е і інш. паведамілі пра ўзровень меламіну ў сухім малацэ ад 0,00528 да 0,0122 мг/кг.
У табліцы 3 падсумаваны вынікі ацэнкі рызыкі для трох узроставых груп. Рызыка была меншай за 1 ва ўсіх узроставых групах. Такім чынам, неканцэрагеннай рызыкі для здароўя ад меламіну ў дзіцячых сумесях няма.
Больш нізкі ўзровень забруджвання малочных прадуктаў можа быць выкліканы ненаўмысным забруджваннем падчас падрыхтоўкі, у той час як больш высокі ўзровень можа быць выкліканы наўмысным даданнем. Акрамя таго, агульная рызыка для здароўя чалавека ад ужывання малочных прадуктаў з нізкім узроўнем меламіну лічыцца нізкай. Можна зрабіць выснову, што ўжыванне прадуктаў, якія змяшчаюць такі нізкі ўзровень меламіну, не ўяўляе ніякай рызыкі для здароўя спажыўцоў52.
Улічваючы важнасць кіравання бяспекай харчовых прадуктаў у малочнай прамысловасці, асабліва з пункту гледжання аховы здароўя насельніцтва, надзвычай важна распрацаваць і праверыць метад ацэнкі і параўнання ўзроўняў і рэшткаў меламіну ў сухім малацэ і дзіцячых сумесях. Для вызначэння меламіну ў дзіцячых сумесях і сухім малацэ быў распрацаваны просты і дакладны метад ВЭЖХ-УФ-спектрафатометрыі. Метад быў правераны, каб гарантаваць яго надзейнасць і дакладнасць. Было паказана, што межы выяўлення і колькаснага вызначэння метаду дастаткова адчувальныя для вымярэння ўзроўню меламіну ў дзіцячых сумесях і сухім малацэ. Згодна з нашымі дадзенымі, меламін быў выяўлены ў большасці іранскіх узораў. Усе выяўленыя ўзроўні меламіну былі ніжэйшыя за максімальна дапушчальныя межы, устаноўленыя CAC, што сведчыць аб тым, што спажыванне гэтых відаў малочных прадуктаў не ўяўляе рызыкі для здароўя чалавека.
Усе выкарыстаныя хімічныя рэагенты былі аналітычнай ступені чысціні: меламін (2,4,6-трыаміна-1,3,5-трыазін) чысцінёй 99% (Sigma-Aldrich, Сэнт-Луіс, Місуры); ацэтанітрыл, прыдатны для ВЭЖХ (Merck, Дармштадт, Германія); ультрачыстая вада (Millipore, Морфхайм, Францыя). Аднаразовыя шпрыцавыя фільтры (Chromafil Xtra PVDF-45/25, памер пор 0,45 мкм, дыяметр мембраны 25 мм) (Macherey-Nagel, Дзюрэн, Германія).
Для падрыхтоўкі ўзораў выкарыстоўвалі ультрагукавую ванну (Elma, Германія), цэнтрыфугу (Beckman Coulter, Крэфельд, Германія) і ВЭЖХ (KNAUER, Германія).
Выкарыстоўваўся высокаэфектыўны вадкасны храматограф (KNAUER, Германія), абсталяваны УФ-дэтэктарам. Умовы аналізу ВЭЖХ былі наступнымі: выкарыстоўвалася сістэма UHPLC Ultimate, абсталяваная аналітычнай калонкай ODS-3 C18 (4,6 мм × 250 мм, памер часціц 5 мкм) (MZ, Германія). Элюентам ВЭЖХ (рухомая фаза) была сумесь TFA/метанол (450:50 мл) з хуткасцю патоку 1 мл/мін. Даўжыня хвалі дэтэктавання складала 242 нм. Аб'ём ін'екцыі складаў 100 мкл, тэмпература калонкі — 20 °C. Паколькі час утрымання прэпарата доўгі (15 хвілін), наступную ін'екцыю варта рабіць праз 25 хвілін. Меламін ідэнтыфікавалі шляхам параўнання часу ўтрымання і піка УФ-спектра меламінавых стандартаў.
Стандартны раствор меламіну (10 мкг/мл) быў падрыхтаваны з выкарыстаннем вады і захоўваўся ў халадзільніку (4 °C) у месцы, абароненым ад святла. Развядзіце маткавы раствор рухомай фазай і прыгатуйце рабочыя стандартныя растворы. Кожны стандартны раствор уводзілі ў ВЭЖХ 7 разоў. Калібровачнае ўраўненне 10 было разлічана шляхам рэгрэсійнага аналізу вызначанай плошчы піка і вызначанай канцэнтрацыі.
Камерцыйна даступнае сухое каровіна малако (20 узораў) і ўзоры розных марак дзіцячых сумесяў на аснове каровінага малака (20 узораў) былі набыты ў мясцовых супермаркетах і аптэках Ірана для кармлення немаўлят розных узроставых груп (0–6 месяцаў, 6–12 месяцаў і >12 месяцаў) і захоўваліся пры тэмпературы ў халадзільніку (4 °C) да аналізу. Затым 1 ± 0,01 г гамагенізаванага сухога малака ўзважвалі і змешвалі з ацэтанітрылам:вада (50:50, аб./аб.; 5 мл). Сумесь перамешвалі на працягу 1 хвіліны, затым апрацоўвалі ультрагукам у ультрагукавой ванне на працягу 30 хвілін і, нарэшце, страсяналі на працягу 1 хвіліны. Затым сумесь цэнтрыфугавалі пры 9000 × g на працягу 10 хвілін пры пакаёвай тэмпературы, і супернатант фільтравалі ў 2-мл флакон з аўтасамплерам з выкарыстаннем шпрыцавага фільтра 0,45 мкм. Затым фільтрат (250 мкл) змешвалі з вадой (750 мкл) і ўводзілі ў сістэму ВЭЖХ10,42.
Для праверкі метаду мы вызначылі аднаўленне, дакладнасць, мяжу выяўлення (LOD), мяжу колькаснага вызначэння (LOQ) і дакладнасць у аптымальных умовах. LOD вызначаўся як утрыманне ўзору з вышынёй піка ў тры разы вышэйшай за базавы ўзровень шуму. З іншага боку, утрыманне ўзору з вышынёй піка ў 10 разоў вышэйшай за стаўленне сігнал/шум вызначалася як LOQ.
Рэакцыя прылады вызначалася з дапамогай калібравальнай крывой, якая складаецца з сямі кропак дадзеных. Выкарыстоўваліся розныя значэнні ўтрымання меламіну (0, 0,2, 0,3, 0,5, 0,8, 1 і 1,2). Была вызначана лінейнасць працэдуры разліку меламіну. ​​Акрамя таго, у холастыя ўзоры дадаваліся некалькі розных узроўняў меламіну. ​​Калібравальная крывая была пабудавана шляхам бесперапыннага ўвядзення 0,1–1,2 мкг/мл стандартнага раствора меламіну ва ўзоры дзіцячай сумесі і сухога малака, а яе R2 = 0,9925. Дакладнасць ацэньвалася па паўтаральнасці і ўзнаўляльнасці працэдуры і дасягалася шляхам увядзення ўзораў у першы і тры наступныя дні (у трох паўторах). Паўтаральнасць метаду ацэньвалася шляхам разліку RSD % для трох розных канцэнтрацый дададзенага меламіну. ​​Для вызначэння дакладнасці былі праведзены даследаванні аднаўлення. Ступень здабывання метадам экстракцыі была разлічана пры трох узроўнях канцэнтрацыі меламіну (0,1, 1,2, 2) ва ўзорах дзіцячай сумесі і сухога малака9,11,15.
Разліковая сутачная норма спажывання (EDI) вызначалася па наступнай формуле: EDI = Ci × Cc/BW.
Дзе Ci — сярэдняе ўтрыманне меламіну, Cc — спажыванне малака, а BW — сярэдняя вага дзяцей.
Аналіз дадзеных быў праведзены з выкарыстаннем SPSS 24. Нармальнасць правяралася з дапамогай тэсту Колмагорава-Смірнова; усе дадзеныя былі непараметрычнымі тэстамі (p = 0). Таму для вызначэння значных адрозненняў паміж групамі выкарыстоўваліся тэст Краскела-Уоліса і тэст Манна-Уітні.
Інгельфінгер, малодшы. Меламін і яго ўплыў на глабальнае забруджванне харчовых прадуктаў. Часопіс медыцыны Новай Англіі 359(26), 2745–2748 (2008).
Лінч, Р.А. і інш. Уплыў pH на міграцыю меламіну ў дзіцячых місках. Міжнародны часопіс па забруджванні харчовых прадуктаў, 2, 1–8 (2015).
Барэт, М.П. і Гілберт, І.Х. Нацэльванне таксічных злучэнняў на ўнутраную частку трыпанасом. Прагрэс у паразіталогіі 63, 125–183 (2006).
Нірман, М. Ф. і інш. Ацэнка меламінавых дендрымераў як носьбітаў дастаўкі лекаў in vitro і in vivo. Міжнародны фармацэўтычны часопіс, 281(1–2), 129–132(2004).
Сусветная арганізацыя аховы здароўя. Сустрэчы экспертаў 1–4 па разглядзе таксікалагічных аспектаў меламіну і цыянуравай кіслаты (2008 г.).
Хоу, А.К.-К., Кван, Т.Х. і Лі, П.К.-Т. Таксічнасць меламіну і ныркі. Часопіс Амерыканскага таварыства нефралогіі 20(2), 245–250 (2009).
Озцюрк, С. і Дэмір, Н. Распрацоўка новага адсарбента IMAC для ідэнтыфікацыі меламіну ў малочных прадуктах метадам высокаэфектыўнай вадкаснай храматаграфіі (ВЭЖХ). Часопіс сінтэзу і аналізу харчовых прадуктаў 100, 103931 (2021).
Chansuvarn, V., Panic, S. і Imim, A. Простае спектрафатаметрычнае вызначэнне меламіну ў вадкім малацэ на аснове рэакцыі Грына Маніха. Spectrochem. Acta Part A Mol. Biomol. Spectrosc. 113, 154–158 (2013).
Дыбес, М. і Эль-Хабіб, Р. Вызначэнне меламіну ў дзіцячых сумесях, сухім малацэ і ўзорах пангасіуса метадам ВЭЖХ/дыёдна-матрычнай храматаграфіі. Часопіс экалагічнай аналітычнай таксікалогіі, 2(137), 2161–0525.1000137 (2012).
Скіннер, К. Г., Томас, Дж. Д. і Остэрлох, Дж. Д. Таксічнасць меламіну. ​​Часопіс медыцынскай таксікалогіі, 6, 50–55 (2010).
Сусветная арганізацыя аховы здароўя (СААЗ), Таксікалогія і аспекты меламіну і цыянуравай кіслаты для здароўя: справаздача аб сумеснай сустрэчы экспертаў СААЗ/ФАО, падтрыманай Міністэрствам аховы здароўя Канады, Атава, Канада, 1-4 снежня 2008 г. (2009).
Корма, С.А. і інш. Параўнальнае даследаванне ліпіднага складу і якасці парашка для немаўлят, які змяшчае новыя функцыянальныя структурныя ліпіды, і камерцыйнай немаўлячай сумесі. Еўрапейскія харчовыя даследаванні і тэхналогіі 246, 2569–2586 (2020).
Эль-Васіф, М. і Хашэм, Х. Павышэнне харчовай каштоўнасці, якасных характарыстык і тэрміну прыдатнасці дзіцячай сумесі з выкарыстаннем пальмавага алею. Часопіс сельскагаспадарчых даследаванняў Блізкага Усходу 6, 274–281 (2017).
Інь, У. і інш. Атрыманне монакланальных антыцелаў супраць меламіну і распрацоўка непрамога канкурэнтнага метаду ІФА для выяўлення меламіну ў сырым малацэ, сухім малацэ і корме для жывёл. Часопіс сельскагаспадарчай і харчовай хіміі 58(14), 8152–8157 (2010).